摘要：

干眼病（DED）是一種多因素的眼表疾病，影響全球數(shù)百萬人，其特征是眼表炎癥和損傷。目前尚不清楚角膜自噬是否參與DED中觀察到的眼表炎癥。為了測試這種參與，干眼（DE）在由容納在一個(gè)可控環(huán)境的雌性C57BL/6小鼠中誘導(dǎo)皮下注射的東莨菪堿.在這些小鼠的角膜中檢測到自噬相關(guān)蛋白LC3B和ATG5的表達(dá)和自噬的激活。用自噬激活劑LYN-1604治療減輕了DE小鼠的臨床適應(yīng)癥，包括淚液產(chǎn)生和角膜熒光染色。LYN-1604還降低了角膜炎癥反應(yīng)產(chǎn)物的水平，包括腫瘤壞死因子α（TNF-α）和基質(zhì)金屬蛋白酶-3和-9。相比之下，用自噬抑制劑3-MA治療DE小鼠會(huì)加劇DE的臨床適應(yīng)癥并增加炎癥反應(yīng)產(chǎn)物的水平。這是第一項(xiàng)表明自噬可以調(diào)節(jié)眼表炎癥水平的研究，表明調(diào)節(jié)自噬的藥物可以緩解眼表炎癥并治療DED。

介紹

干眼病（DED）是一種多因素的眼表疾病，在全球范圍內(nèi)發(fā)病率很高，其特征是淚膜失去穩(wěn)態(tài)，并伴有眼部癥狀，如眼睛刺激、流淚和畏光。淚膜不穩(wěn)定和高滲導(dǎo)致眼表炎癥和損傷，導(dǎo)致神經(jīng)感覺異常。角膜上皮屏障在DED中可能會(huì)受到損害。盡管DED的發(fā)病機(jī)制尚不清楚，但眼表炎癥在其發(fā)展中起著重要作用。引流淋巴結(jié)中的幼稚T淋巴細(xì)胞受到眼表抗原呈遞細(xì)胞（APC）的激活的刺激。效應(yīng)Th1和Th17細(xì)胞隨后將細(xì)胞因子和基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）分泌到眼表，造成損傷并促進(jìn)慢性炎癥。因此，DED的治療旨在抑制眼表炎癥、增強(qiáng)淚膜穩(wěn)定性、降低淚液滲透壓、維持角膜穩(wěn)態(tài)和緩解眼部刺激。

自噬是一種自噬的細(xì)胞過程，影響炎癥細(xì)胞（包括淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞）的存活、穩(wěn)態(tài)和發(fā)育，這些細(xì)胞在多種炎癥疾病的機(jī)制和發(fā)展中發(fā)揮重要作用。自噬不斷捕獲老化或受損的細(xì)胞物質(zhì)，用于溶酶體降解和再循環(huán)。當(dāng)自噬通量長期升高或缺乏時(shí)，健康就會(huì)受到影響。自噬被證明發(fā)生在淚腺中（LG）的干眼（DE）小鼠模型，表明自噬可以防止進(jìn)一步的腺泡細(xì)胞損傷并維持正常的LG功能。此外，干燥綜合征患者淚膜和結(jié)膜上皮細(xì)胞的自噬增強(qiáng)或失調(diào)。然而，目前尚不清楚角膜自噬是否參與DED中觀察到的眼表炎癥。

此次動(dòng)物實(shí)驗(yàn)通過測定DE小鼠角膜自噬的發(fā)生和激活，探討角膜自噬與DED眼表炎癥之間的關(guān)系。該研究還評(píng)估了自噬激活劑和自噬抑制劑對(duì)這些小鼠自噬、炎癥抑制劑的表達(dá)和DE癥狀的影響。

<圖1>

方法與結(jié)果

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)通過建立DE模型小鼠進(jìn)行研究。結(jié)果顯示干眼模型對(duì)角膜染色用熒光素鈉和淚液產(chǎn)生（見圖二），檢測DE小鼠角膜上的自噬（見圖三）；DE中角膜屏障的破壞與炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生增加有關(guān)，尤其是TNF-α、MMP-3和MMP-9。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，炎癥信號(hào)的角膜表達(dá)（見圖四）；研究進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，LYN-1604增強(qiáng)和3-MA抑制DE小鼠角膜中的自噬（見圖五），自噬激活劑對(duì)淚液產(chǎn)生和眼表損傷的影響（見圖六），自噬激活對(duì)炎癥水平的影響（見圖七）。

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結(jié)論

目前，DE的治療方法是使用潤滑眼表的人工淚液或減少眼表炎癥的局部抗炎劑。其他治療選擇，包括全身抗炎藥，可用于對(duì)局部滴眼液無反應(yīng)的患者。自噬通過影響炎癥細(xì)胞的存活條件和改變細(xì)胞因子的轉(zhuǎn)錄、加工和分泌來調(diào)節(jié)炎癥。相反，自噬受細(xì)胞因子水平的調(diào)節(jié)。因此，作者評(píng)估了自噬調(diào)節(jié)劑可以緩解與DE相關(guān)的眼表炎癥。

總之，本研究表明自噬在DED的發(fā)病機(jī)制中起重要作用。含有自噬激活劑的滴眼液的應(yīng)用可能在臨床上用于治療DED。本研究發(fā)現(xiàn)為臨床炎癥抑制劑在眼表疾病治療中的應(yīng)用提供了見解。需要進(jìn)一步研究評(píng)估自噬與DED發(fā)病機(jī)制之間的關(guān)系，以便為DED提供更好的治療。此外，下一步將使用更多方法檢測。